배양된 사람치은각화상피세포의 미세구조
CULTURED HUMAN ORAL KERATINOCYTES; UITRASTRUCTURAL STUDY
권용대, 이백수, 주성숙,
소속 상세정보
권용대 ( ) - 경희대학교 치과대학 구강악안면외과학교실
이백수 ( ) - 경희대학교 치과대학 구강악안면외과학교실
주성숙 ( ) - 경희대학교 치과대학 구강해부학교실
KMID : 0360119990210030231
Abstract
결론
저자는 약 10세된 여아의 구강내 소수술시 얻어진 각화치은을 이용하여 치은각화상피조직
을 배양하며 도립위상차현미경으로 관찰하였고, 또한 이의 미세구조적 연구를 위하여 통법
의 배양조직의 표본제작법을 통하여 표본을 제작한 후 투과전자현미경으로 관찰하여 다음과
같은 결론을 얻었다.
1. 외식된 조직소편으로부터 배양 시작으로부터 약 3일후 최초로 상피세포의 증식이 도립
위상차현미경상에 나타났으며, 배양되는 치은각화상피세포들은 활발한 분열상을 보이고 있
었으며 증가된 핵/세포질 비율 및 유사분열의 소견을 보이고 있었다.
2. 배양되는 치은각화상피세포들중에서 변연부의 세포들에서 특이적인 부채모양(fan-like
appearance)의 세포질의 확장소견을 보였으며 외식된 조직소편 부근에서부터 치은각화상피
들의 성층화를 보이기 시작했다.
3. 미세구조적관찰에서 배양된 치은각화상피세포들은 약 10여층의 중층을 이루고 있었으
며, 정상조직에서 볼 수 있는 세포층간의 형태적 차이는 보이지 않고 모두 길쭉하게 연장된
모습을 보이고 있었다.
4. 핵이 소실된 세포들도 상당수 관찰되었으며 높은 전자밀도를 보이는 각화초자과립
(keratohyaline granule)등 의 세포내 과립들이 관찰되었다. 또한 대부분의 세포소기관들은
퇴화하고 있었으며 세포질내에는 다량의 당김원섬유들이 산재해 있었다.
5. 세포간의 결합은 주로 세포간교(desmosome)에 의해 이루어지고 있었으며 그 출현빈도
는 정상조직과 비교하여 다소 낮은 것으로 생각되었다.
6. 이와 같은 소견상 배양된 치은각화상피세포들은 모세포와 유사한 분화과정을 겪으며
정상적인 각화상피세포들과 같이 최종분화(terminal differentiation)하는 것으로 짐작되었다.
In oral and maxillofacial surgery, there are many cases requiring the graft of
epidermal tissues such as maxillectomy, and vestibuloplasty There have been so many
challenges for the culture of the epidermal tissue.
Observing the ultrastructure of the cultured human oral kertinocytes, we could
compare this findings with that of in vivo ones. With that, we could find the
differencies and similarities between cultured cells and in vivo ones, and evaluate the
clinical applications of cultured tissue. Human gingiva wag obtained and the specimen
was explanted on 24-well plate. Two types of culture media were used in thin culture
system. One was for the growth of the keratinocytes (Media Ⅰ), and the other was far
the stratification (Media Ⅱ). Media Ⅰ had special ingredients for the epidermal growth.
; Those were 0.5% dimethyl sulfoxide (DMSO), 30ng/㎖ of epidermal growth factor
(EGF), 30ng/㎖ of cholera toxin, and 5㎍/㎖ of transferrin.
We cultured the oral keratinocytes for 3 weeks, and at that time the cultured
keratinocytes were processed to prepare the specimen for the TEM study.
The results were as follows. ;
1. In the phase contrast micrograph. epidermal outgrowth firstly appeared on the 3rd
day after explantation, and the growing keratinocytes were activley mitotic, and had
polygonal shale and increased N/C ratio.
2. In the phase contrast micrograph, the outer mosts cells exhibited areal where broad
cytoplasmic processes extended out onto the culture subtratum(fan-like appaearance).
3. In the TEM micrographs, the cultured keratinocytes showed stratification. The cells
were in elongated form, and there were no morphologic differencies among the layers
usually found in the in vivo gingiva,
4. Most of cellular organelles underwent lysis, and keratohyaline granules were seen.
Tonosfibrils were dispersed in the cytoplasm.
5. The cells were interconnected by desmosomes, and their frequency of distribution
was considered to be lower than that of in vivo keratinocytes.
6. We could conclude the cultured oral keratinocytes exhibited signs of terminal
differentiation.
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